우리 주변에는 평범해 보이지만 사실은 묵묵히 우리에게 많은 기여를 하고 있는 숨은 영웅들이 많습니다.단백질분해효소 K는 분자 진단 산업에서 "숨겨진 영웅"이지만, 업계의 "크고 강력한" 제품과 비교할 때 단백질분해효소 K는 너무 중요하지 않아서 오랫동안 그 중요성을 간과해 왔습니다.새로운 크라운 전염병이 발생하면서 단백질 분해 효소 K에 대한 수요가 급증하고 국내외 공급이 소비에 훨씬 뒤처져 모두가 갑자기 단백질 분해 효소 K가 매우 중요하다는 것을 깨달았습니다.
단백질분해효소 K의 용도는 무엇인가요?
Proteinase K는 단백질 분해효소 활성을 갖는 세린 프로테아제로 다양한 환경(pH(4-12.5), 고염 완충액, 70°C의 고온 등)에서 활성을 유지할 수 있습니다.또한, SDS, 요소, EDTA, 구아니딘염산염, 구아니딘이소티오시아네이트 등에 의해서도 단백질분해효소 K의 활성이 저해되지 않으며, 일정량의 세제를 사용하여도 단백질분해효소 K의 활성을 높일 수 있습니다. 의학적 치료(바이러스 및 미생물 소독) ), 식품(고기 연화), 가죽(모발 연화), 포도주 양조(알코올 정화), 아미노산 제제(분해 깃털), 핵산 추출, 현장 혼성화 등에 프로테이나제 K 등의 용도가 있습니다.가장 일반적으로 사용되는 응용 분야는 핵산 추출입니다.
Proteinase K는 핵산에 단단히 결합된 히스톤을 포함하여 시료 내 모든 종류의 단백질을 효소분해할 수 있으므로 핵산이 시료에서 방출되어 추출물로 방출되어 추출 및 정제의 다음 단계를 촉진할 수 있습니다.바이러스 핵산 검출에서 단백질분해효소 K는 바이러스 샘플링 솔루션의 중요한 구성 요소 중 하나입니다.Proteinase K는 바이러스의 외피 단백질을 분해하여 비활성화할 수 있으며 이는 운송 및 탐지 단계에서 더 안전합니다.또한, 단백질분해효소 K는 RNase를 분해하여 바이러스 RNA의 분해를 방지하고 핵산 검출을 촉진합니다.
단백질분해효소 K의 하룻밤 사이의 명성
과학 연구 분야든 IVD 분야든 핵산 추출은 가장 기본적인 실험이기 때문에 Proteinase K는 언제나 매우 중요한 존재였습니다.그러나 과거에는 단백질분해효소 K가 그 역할에 비해 훨씬 덜 알려져 있었습니다.이는 단백질분해효소 K의 수급관계가 매우 안정적이었기 때문이 컸다.단백질분해효소 K의 공급이 문제가 될 것이라고 생각하는 사람은 거의 없을 것입니다.
신형 크라운 전염병이 발생하면서 핵산 검사에 대한 수요가 급증했습니다.2020년 6월 말 현재 중국은 거의 9천만 건에 달하는 새로운 크라운 테스트를 완료했으며 이 수치는 전 세계적으로 더욱 놀라운 수치입니다.핵산 추출 실험에서 단백질분해효소 K의 작업 농도는 약 50-200μg/mL입니다.일반적으로 핵산 샘플을 추출하려면 약 100μg의 단백질분해효소 K가 필요합니다.실제 사용에서는 핵산 추출 효율을 높이기 위해 Proteinase K의 사용량을 증가시키는 경우가 많습니다.신형 코로나바이러스의 핵산 검출로 인해 많은 양의 단백질분해효소 K 수요가 발생했습니다.단백질분해효소 K의 원래 공급과 수요 균형은 빠르게 깨졌고, 단백질분해효소 K는 하룻밤 사이에 중요한 전염병 예방 물질이 되었습니다.
Proteinase K 생산의 어려움
전염병이 발전함에 따라 단백질 분해효소 K의 중요한 가치가 사람들에게 중요하게 여겨지고 있지만, 단백질 분해효소 K의 과도한 저품질로 인해 국내에서는 단백질 분해효소 K 생산에 참여하는 기업이 거의 없다는 사실이 당황스럽습니다. 단백질분해효소 K 생산을 확립하고 싶습니다. 생산 과정에서 단백질분해효소 K가 매우 특별한 단백질이라는 것이 발견되었습니다.단기간에 단백질분해효소 K의 생산 능력을 확장하는 것은 매우 어려운 일입니다.
Proteinase K의 대규모 생산에는 다음과 같은 어려움이 있습니다.
1. 표현력이 낮다
Proteinase K는 대부분의 단백질을 비특이적으로 분해하여 발현 숙주 세포에 심각한 독성을 일으킬 수 있습니다.따라서, 단백질분해효소 K의 발현 수준은 일반적으로 매우 낮습니다.단백질분해효소 K를 고도로 발현하는 발현 시스템 및 균주를 스크리닝하려면 일반적으로 더 긴 주기가 필요합니다.
2. 색소 및 핵산의 잔류물
대규모 발효는 다량의 색소와 숙주 핵산 잔류물을 도입합니다.이러한 불순물을 단순한 정제과정으로는 제거하기 어려우며, 복잡한 정제로 인해 비용이 증가하고 회수율이 감소합니다.
3. 불안정성
Proteinase K는 충분히 안정적이지 않고 스스로 효소분해가 가능하며, 보호제 없이 37°C에서 장기간 안정적으로 보관하기가 어렵습니다.
4. 침전이 쉽다.
동결건조 단백질분해효소 K 분말을 제조할 때, 동결건조 분말 중의 단백질분해효소 K의 고형분 함량을 높이기 위해서는 동결건조 보호제를 고농도로 첨가할 필요가 있으나, Proteinase K의 농도가 20mg/mL 이상이면 쉽게 응집되어 침전물이 형성되어 고형분 함량이 높은 Proteinase K의 동결건조가 매우 어렵습니다.
5. 대규모 투자
Proteinase K는 강력한 프로테아제 활성을 가지며 실험실에서 다른 프로테아제를 가수분해할 수 있습니다.따라서 단백질분해효소 K는 연구개발 및 생산을 위한 전문적인 생산지역과 장비, 인력이 필요합니다.
XD BIOCHEM의 Proteinase K 솔루션
XD BIOCHEM은 성숙한 단백질 발현 및 정제 플랫폼을 보유하고 있으며, 재조합 단백질의 발현 및 정제, 생산 공정 최적화 분야에서 풍부한 경험을 보유하고 있습니다.연구개발팀의 신속한 구성을 통해 단백질분해효소 K의 대규모 생산 공정을 극복했습니다.동결건조분말의 월간 생산량은 30KG 이상입니다.이 제품은 안정적인 성능, 높은 효소 비활성, 숙주 시토크롬 및 핵산 잔기가 없습니다.XD BIOCHEM에 문의하신 것을 환영합니다. 평가판 패키지를 받으십시오(이메일:sales@xdbiochem.com전화: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM의 기술 솔루션에는 다음이 포함됩니다.
다중 복사 플라스미드 통합을 사용하여 발현 수준이 8g/L인 고발현 균주를 선택하여 단백질분해효소 K의 발현 수준이 낮은 문제를 극복합니다.
다단계 정제 공정 확립을 통해 숙주 시토크롬과 단백질분해효소 K의 핵산 잔기를 기준치 이하로 성공적으로 제거했습니다.
보호 완충제 제제의 고처리량 스크리닝을 통해 단백질분해효소 K를 37°C에서 안정적으로 저장할 수 있는 완충제를 선택했습니다.
스크리닝 완충액은 단백질분해효소 K가 고농도에서 쉽게 응집 및 침전된다는 문제를 극복하고, 단백질분해효소 K의 고형분 동결건조 기반을 마련합니다.
XD BIOCHEM 단백질분해효소 K 샘플
XD BIOCHEM 단백질분해효소 K 안정성 테스트: 실온에서 80일 후에도 활성에 큰 변화가 없습니다.
XD BIOCHEM 단백질분해효소 K 안정성 테스트: 실온에서 80일 후에도 활성에 큰 변화가 없습니다.
XD BIOCHEM Proteinase K와 경쟁제품의 핵산추출 효과 비교핵산 추출 과정에는 각각 XD BIOCHEM과 경쟁적 단백질분해효소 K가 사용됩니다.XD BIOCHEM Proteinase K의 추출 효율은 더 높고, 타겟 유전자의 Ct 값은 더 낮습니다.
게시 시간: 2021년 12월 31일